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RNA HS Assay Kit工作原理具體分析

更新時間:2024-07-15      點擊次數(shù):1530
   RNA HS Assay Kit的工作原理可以通過熒光染料選擇性結(jié)合、熒光信號的產(chǎn)生和處理、耐受性與特異性等方面來理解。以下是對工作原理的具體分析:
  1.熒光染料選擇性結(jié)合:
  Kit使用特定的熒光染料,這些染料具有高度選擇性,僅在與RNA結(jié)合時才會發(fā)出熒光信號。這種選擇性結(jié)合確保了該試劑盒能夠準(zhǔn)確區(qū)分RNA和其他核酸,如DNA。
  當(dāng)熒光染料與RNA結(jié)合時,它會經(jīng)歷一個熒光性質(zhì)的變化,即熒光增強。這種特性使得檢測變得非常靈敏,即使是低豐度的RNA樣品也能被準(zhǔn)確檢測到。
  2.熒光信號的產(chǎn)生和處理:
  一旦熒光染料與RNA結(jié)合,就會發(fā)出熒光信號。這些信號通過Qubit熒光計或兼容的熒光檢測設(shè)備讀取,并轉(zhuǎn)化為RNA濃度的數(shù)值。
  Qubit儀器會計算熒光信號的強度,并將其與預(yù)先設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線對比,從而得到RNA的精確濃度。此過程僅需約2分鐘即可完成,顯著提高了實驗效率。
  3.耐受性與特異性:
  RNA HS Assay Kit設(shè)計時考慮了實驗中可能遇到的各種污染物,如鹽、溶劑、去污劑等。該試劑盒對這些污染物具有出色的耐受性,不會影響RNA的定量結(jié)果。
  試劑盒中的熒光染料不僅與RNA特異結(jié)合,而且還能區(qū)分DNA和RNA。這一點對于需要準(zhǔn)確RNA定量的下游應(yīng)用尤其重要,如cDNA合成和RT-qPCR實驗。
  4.靈敏度與動態(tài)范圍:
  該試劑盒能夠精準(zhǔn)定量低至250 pg/μL的RNA樣品,檢測范圍從250 pg/μL到100 ng/μL。這使得它非常適合于低豐度RNA樣本的分析。
  相比傳統(tǒng)的紫外吸收法,Qubit RNA HS Assay提供了更高的檢測靈敏度和更寬的定量范圍,可以顯著降低背景噪音,從而實現(xiàn)對稀釋樣品的準(zhǔn)確測量。
 

RNA HS Assay Kit

 

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